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造就基
产品注明
原代神经母细胞瘤前提沉编程造就基是一种为推进人源神经母细胞瘤原代细胞体表成长而开发的造就基。它是一种无菌的液体混合系统，含有必须和非必须的氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、成长因子、微量矿物质等。该造就基产品基于碳酸氢盐的缓冲系统，在5% CO2、37℃造就箱中平衡时，pH值为7.4。该造就基的配方能够提供一个相宜的人源神经母细胞瘤原代细胞体表造就环境，选择性地推进体表人源神经母细胞瘤原代细胞的成长。实现了体表造就周期短、成本可控、操作便捷的主张，提高了肿瘤组织原代细胞造就成功率。
使用注明
1. 神经母细胞瘤原代细胞造就
获取的人源神经母细胞瘤原代细胞，依照说明书中细胞数接种在相宜的造就器皿中，参与γ射线辐照后的NIH-3T3细胞(γ-NIH-3T3作为滋养层细胞，增长滋养细胞数量详见说明书)，原代细胞初次接种后2~3 天勿动(利于细胞贴壁)，造就过程中若造就基色彩变黄但细胞未长满时可进行半换液，镜下观察细胞未长满但γ-NIH-3T3细胞已不实时，适量补充γ-NIH-3T3细胞(通常补加初始数主张一半)。
2. 神经母细胞瘤原代细胞传代
镜下观察细胞形成克隆及神经元样细胞增殖，且聚合度85~95%时即可传代;造就箱中取出细胞，弃旧造就液，0.05%胰酶洗涤5秒后吸尽，再参与适量0.05%胰酶，37℃孵育，2~5min后拿出轻拍造就瓶/板侧面，显微镜下观察细胞消化情况；细胞消化至细胞变圆并起头脱落时用原代细胞终止造就基终止消化，并将细胞转移至离心管中，1500 rpm，3 min；弃上清，以1~5 mL前提造就基沉悬细胞，活细胞计数，将细胞悬液按适合的细胞密度接种于造就瓶/板，参与γ-NIH-3T3细胞(分歧规格造就瓶/板底面积、接种原代细胞数量、增长滋养细胞数量详见说明书)，补加前提造就基至所需体积，十字交叉混匀，造就容器75%表表消毒后置37 ℃ 、5 % CO2造就箱造就。其他步骤同上。
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