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造就基
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肠癌齐全造就基是一种为推进人源肠癌原代细胞体表成长而开发的造就基 。它是一种无菌的液体混合系统，含有必须和非必须的氨基酸、维生素、有机和无机化合物、激素、成长因子、微量矿物质等 。造就基基于碳酸氢盐的缓冲系统，在5% CO2、37℃造就箱中平衡时，pH值为7.4 。该造就基的配方能够提供一个相宜的人源肠癌原代细胞体表造就环境，选择性地推进体表人源肠癌原代细胞的成长 。
使用注明
1. 肠癌原代细胞造就
至少提前半幼时使用稀释后的Matrigel基质胶预铺造就瓶/板，使用前吸弃基质胶，用稀释液润洗一遍 。将分离并计数后的细胞悬液参考说明书表1中细胞数量接种于造就瓶/板，补加齐全造就基至所需体积，轻轻摇摆混匀，75%酒精表表消毒后置造就箱，37 ℃ 、5 % CO2造就；原代细胞初次接种后2-3 天内勿动(利于细胞贴壁)，第一次换液建议换半液 。
2. 肠癌原代细胞传代
镜下观察细胞形成克隆，且聚合度85~95%时即可传代；造就箱中取出细胞，弃旧造就液，0.05%胰酶洗涤5秒后吸尽，再参与适量0.05%胰酶，37℃孵育，2~5min后拿出轻拍造就瓶/板侧面，显微镜下观察细胞消化情况；细胞消化至细胞变圆并起头脱落时用原代细胞终止造就基终止消化，并将细胞转移至离心管中，1500 rpm，3 min；弃上清，以1~5 mL前提造就基沉悬细胞，活细胞计数，将细胞悬液按适合的细胞密度接种于造就瓶/板，(分歧规格造就瓶/板底面积、接种原代细胞数量、增长滋养细胞数量详见说明书)，补加造就基至所需体积，十字交叉混匀，造就容器75%表表消毒后置37 ℃ 、5 % CO2造就箱造就 。其他步骤同上 。
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货号： PRS-ICM-CR
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