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造就基
产品注明
乳腺上皮细胞齐全造就基是一种推进人乳腺原代上皮细胞体表成长的造就基。该产品是一种无菌的液体混合系统，含有维持主张细胞成长所必须的氨基酸、维生素、有机和无机化合物以及成长因子等。造就基基于碳酸氢盐的缓冲系统，在5% CO2/95%空气的造就箱中平衡时，pH值为7.4。该造就基的配方能够提供一个相宜的营养环境，选择性地推进体表人乳腺原代上皮细胞的成长和扩增。
使用注明
4℃避光保留1个月内有效。
1.乳腺癌原代细胞造就
选取预冷的DMEM/F-12造就基将细胞表基质胶(Corning#356231)按1：50比例稀释，至少提前30 min将稀释后的基质胶预铺在造就瓶/板底部表表，并使其齐全覆盖底部表表，30~60 min后吸干备用。将分离并计数后的细胞悬液接种于造就瓶/板，补加齐全造就基至所需体积，轻轻摇摆混匀，表表消毒后置于造就箱，37 ℃ 、5 % CO2前提下进行造就；原代细胞初次接种后2-3 天内勿动(利于细胞贴壁)。
2.原代乳腺上皮细胞传代
镜下观察细胞形成克隆，且聚合度达80~90%时即可传代。造就箱中取出细胞，弃去旧造就液，参与适量TrypLE™ Express酶(Gibco#12605010)37℃孵育，10~20 min后取出，轻拍造就瓶/板侧面，显微镜下观察细胞消化情况。细胞消化至细胞变圆并起头脱落时用含10%胎牛血清的DMEM造就基终止消化，并将细胞转移至离心管中，室温，300 g，离心5 min；弃上清，以1-2 mL齐全造就基沉悬细胞，活细胞计数，将细胞悬液按适合的细胞密度接种于预铺有基质胶的造就瓶/板底部，预铺步骤同步骤1。补加齐全造就基至所需体积，轻轻摇摆混匀，表表消毒后置于造就箱，37 ℃ 、5 % CO2前提下持续造就。
有关产品
货号： PRS-BCM-CR
货号： PRS-BCM-3D
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